À retenir
- Choisissez le solvant en fonction de la solubilité du peptide et de la compatibilité avec l’analyse, pas par habitude.
- Calculez le volume de solvant à partir du contenu net indiqué sur l’étiquette, jamais du poids d’expédition.
- Utilisez du verre borosilicaté avec bouchons en butyle pour les solutions mères aqueuses, acides et contenant du DMSO.
- Étiquetez chaque solution mère avec l’identité du peptide, le numéro de lot, la concentration, le solvant et la date.
- Classez le certificat d’analyse du lot avec les registres d’essai.
Quatre solvants, quatre usages
La plupart des préparations de solutions mères de peptides in vitro utilisent un des quatre solvants suivants : eau stérile, eau bactériostatique conservée au benzyle d’alcool, acide acétique dilué, ou une petite fraction de DMSO suivie d’une dilution aqueuse. Le choix dépend de la solubilité du peptide et de l’analyse prévue, pas de la commodité.
L’eau stérile convient aux peptides qui se dissolvent facilement et aux solutions mères qui seront réparties en aliquotes et congelées rapidement. L’eau bactériostatique est utilisée lorsqu’une solution mère est prélevée plus d’une fois sur le poste de travail. L’acide acétique dilué est utilisé pour les peptides ayant une faible solubilité à pH neutre. Le DMSO est utilisé pour les séquences hydrophobes, puis dilué de sorte que la fraction finale de solvant demeure suffisamment faible pour le système d’analyse utilisé.
Notre Eau bactériostatique stérile, fiole en verre multidose de 30 mL est conservée avec 0,9 % d’alcool benzylique et fournie dans une fiole en verre multidose de 30 mL. Elle est vendue pour usage de laboratoire seulement.
Comparaison des solvants sur le poste de travail
| Solvant | Usage typique | Notes |
|---|---|---|
| Eau stérile | Peptides librement solubles, solutions mères pour usage unique | Sans agent de conservation; répartir en aliquotes et congeler |
| Eau bactériostatique, 0,9 % d’alcool benzylique | Solutions mères de laboratoire à prélèvements multiples | L’alcool benzylique peut interférer avec certaines analyses; vérifier la compatibilité |
| Acide acétique dilué | Séquences basiques ou peu solubles | Inscrire la molarité sur l’étiquette; le pH influence les étapes suivantes |
| DMSO, puis tampon aqueux | Séquences hydrophobes | Documenter la fraction finale de DMSO selon l’analyse |
Notez l’identité du solvant, pas seulement le volume. Une solution mère décrite seulement comme « 1 mg/mL » n’est pas traçable.
Calculer le volume de solvant
Le volume dépend de la concentration cible et du contenu de la fiole. Le contenu net en peptide est indiqué dans le nom et la description du produit; le poids d’expédition indiqué sur une fiche produit correspond au poids emballé pour le transporteur et n’a aucune incidence sur le calcul.
Étapes pour préparer une solution mère
- Lire le contenu net sur l’étiquette et le certificat d’analyse de ce lot.
- Choisir une concentration cible correspondant à la série de dilutions de l’analyse.
- Diviser le contenu par la concentration pour obtenir le volume de solvant.
- Vérifier que le volume convient à l’espace libre de la fiole avant d’ajouter le solvant.
À titre d’exemple, 50 mg de poudre lyophilisée amenés à 10 mg/mL nécessitent 5 mL de solvant. Le contenu de 50 mg de Tripeptide de cuivre GHK-Cu, fiole lyophilisée de 50 mg est testé à une pureté ≥ 99 % par CLHP, avec un certificat d’analyse par lot, de sorte que le contenu nominal peut être utilisé directement dans ce calcul.
Ajouter le solvant lentement le long de la paroi de la fiole. Laisser la pastille se dissoudre sans agitation. Ne pas utiliser de vortex sur une solution mère de peptide, sauf si le protocole l’exige.
Compatibilité des fioles en verre
Le verre borosilicaté est le contenant par défaut pour les solutions mères aqueuses et acides. Il résiste à la plage de pH utilisée dans la plupart des préparations et ne relâche pas de plastifiant dans le solvant. Les bouchons en butyle résistent mieux aux insertions répétées d’aiguille que le caoutchouc naturel.
Pour la répartition en aliquotes, nos Fioles stériles en verre borosilicaté de 10 mL avec bouchons en butyle, boîte de 10 sont fournies à raison de dix par boîte avec sceaux à sertir, à 24,99 $ CAD. Dix fioles permettent de répartir une solution mère de 50 mg en petites aliquotes de travail, afin que la fiole mère ne soit ouverte qu’une seule fois.
Deux points de compatibilité à noter. Le DMSO attaque certains plastiques; conserver donc les solutions mères contenant du DMSO dans du verre. Les peptides contenant du cuivre, dont le GHK-Cu, doivent être tenus loin des tampons chélateurs, sauf si le protocole tient compte de cette interaction.
Étiqueter une solution mère pour qu’elle reste traçable
Une étiquette de solution mère devrait reproduire tout ce dont un second chercheur aurait besoin six mois plus tard. Rédigez-la avant d’ajouter le solvant, pas après.
- Identité du peptide telle qu’elle figure sur le certificat d’analyse.
- Numéro de lot indiqué sur l’étiquette de la fiole.
- Concentration et solvant, avec les chiffres et les unités — par exemple 10 mg/mL dans de l’eau bactériostatique.
- Date de préparation et les initiales de la personne qui l’a préparée.
- Emplacement d’entreposage et le congélateur ou le réfrigérateur auquel elle appartient.
Conservez le certificat d’analyse téléchargeable de ce lot avec les dossiers d’analyse. L’identité, la pureté et la méthode d’essai y sont indiquées, ce qui est justement ce qu’une vérification exige.
Entreposage après reconstitution
La poudre lyophilisée est la forme stable. Une fois le peptide en solution, traitez la solution mère comme un réactif à courte durée de vie et prévoyez les aliquotes en conséquence. Les cycles de gel-dégel constituent le principal stress évitable, ce qui justifie de répartir une solution mère en plusieurs petites fioles plutôt que de revenir sans cesse à une seule.
Conservez les fioles lyophilisées non ouvertes au froid et au sec, tel qu’indiqué sur l’étiquette du produit. Nos fioles sont expédiées dans un emballage à chaîne du froid avec déshydratant, avec suivi depuis Vancouver. Les peptides sont classés sous /fr/product-category/peptides-de-recherche/ et les consommables sous /fr/product-category/fournitures-de-laboratoire/.
Pour usage de recherche en laboratoire seulement. Ne pas utiliser chez l’humain ou l’animal.
